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技術(shù)文章

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親和層析中的蛋白洗脫親和層析是根據(jù)一種生物分子間的特異相互作用來分離物質(zhì)的層析方法，利用待分離物質(zhì)與配體間所具有的特異性親和力來達(dá)到分離目的的一類特殊層析技術(shù)。如抗原與抗體、DNA與RNA、酶與底物或抑制物等。從親和層析填料上洗脫結(jié)合靶標(biāo)是結(jié)合的可逆過程，需優(yōu)化條件，削弱靶標(biāo)和配基之間的相互作用。洗脫條件不應(yīng)使靶蛋白變性，除非這些條件與下游程序兼容。有兩種類型的洗脫方法，即特異性洗脫和非特異性洗脫。特異性洗脫過程中，介質(zhì)或競爭配基或競爭靶標(biāo)，通過這種形式攻擊蛋白質(zhì)-配基復(fù)合物，繼而將靶蛋白釋放至...

1-27 2022
帶你走近月旭離子交換以及HILIC分析柱哈嘍哈嘍，各位親愛的讀者朋友們，大家好呀。好久不見，小編甚是想念大家，不知道大家有沒有想小編呢！今天小編將會給大家?guī)砦覀冊滦駜纱蠛诵囊合嗌V柱-離子交換以及親水分析柱介紹。主要從鍵合相類型，耐受PH范圍，色譜柱具有的特點來帶大家走近我們這兩大核心色譜柱。離子交換色譜的原理離子交換色譜是指離子交換色譜中的固定相中的一些帶電荷的基團(tuán)，這些帶電基團(tuán)通過靜電相互作用與帶相反電荷的離子結(jié)合。如果流動相中存在其他帶相反電荷的離子，按照質(zhì)量作用定律，這些離子將與結(jié)合在固定相上帶相反電荷的...

1-26 2022
如何更好的使用高效液相色譜柱，延長柱壽命？高效液相色譜柱由柱管、壓帽、卡套（密封環(huán)）、篩板（濾片）、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成，壓力不高于70bar時，也可采用厚壁玻璃或石英管，管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。為提高柱效，減小管壁效應(yīng)，不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過拋光。還有使用熔融硅或玻璃襯里的，用于細(xì)管柱。色譜柱兩端的柱接頭內(nèi)裝有篩板，取決于填料粒度，目的是防止填料漏出。高效液相色譜柱的系統(tǒng)由儲液器、泵、進(jìn)樣器、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相，被流動相載入色譜柱（...

1-22 2022
His標(biāo)簽與IMAC配基IMAC重要的應(yīng)用是純化His標(biāo)記重組蛋白，融合表達(dá)的His標(biāo)簽為含有6個或更多組氨酸殘基的片段。His標(biāo)簽具有相當(dāng)高的親和力和特異性，因此在大多數(shù)情況下，IMAC一步純化足以制備一定純度的目標(biāo)蛋白質(zhì)，且可滿足很多應(yīng)用的要求。標(biāo)簽的結(jié)構(gòu)（即位置、順序和長度）可以從多個水平影響蛋白質(zhì)生產(chǎn)：表達(dá)率、與IMAC配基的結(jié)合能力、蛋白質(zhì)三維結(jié)構(gòu)、蛋白質(zhì)晶體的形成等，而且其雖然對溶解度和活性影響輕微，但也有一定作用。His標(biāo)簽常見的形式是由6個連續(xù)的組氨酸殘基組成，可以提供6個金屬結(jié)合位...

1-21 2022
凝膠過濾色譜中的瓊脂糖凝膠瓊脂糖凝膠簡介基于凝膠過濾色譜的原理，對其介質(zhì)的最基本的要求是不能與原料組分發(fā)生除排阻之外的任何其他相互作用，如電荷作用、化學(xué)作用、生物學(xué)作用等。理想的凝膠過濾介質(zhì)具有高物理強(qiáng)度及化學(xué)穩(wěn)定性，能夠耐受高溫高壓和強(qiáng)酸強(qiáng)堿，具有高化學(xué)惰性，內(nèi)孔徑分布范圍窄，珠粒狀顆粒大小均一度高。目前常用的有葡聚糖凝膠、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等。瓊脂糖凝膠來源于一種海藻多糖瓊脂，是一種天然凝膠，不是共價交聯(lián)，所以氫鍵交聯(lián)的鍵能比較弱。它與葡聚糖不同，孔隙度是以改變瓊脂糖濃度而達(dá)到的。瓊脂糖凝...

1-20 2022
蛋白結(jié)合的解離常數(shù)以及在蛋白檢測和親和分離中的應(yīng)用蛋白與配體能否結(jié)合、結(jié)合的強(qiáng)弱會直接影響蛋白檢測或純化實驗的成敗。此篇文章由月旭科技首xi科學(xué)家王國斌博士執(zhí)筆，對蛋白結(jié)合和解離常數(shù)進(jìn)行了較為系統(tǒng)的講述。蛋白和配體結(jié)合的強(qiáng)弱不同，對于蛋白檢測以及親和分離純化實驗有顯著影響。在設(shè)計實驗時應(yīng)考慮這種結(jié)合強(qiáng)弱影響，以便采用合適的蛋白或配體濃度（包括zui低檢測限濃度），估算結(jié)合時間，獲得最佳并且實用的結(jié)果。這對于室溫下易失去活性，或希望盡可能保持最高活性蛋白的純化尤為重要。常規(guī)的蛋白檢測方法，比如ELISA，只能測定實驗結(jié)束時的蛋...

1-18 2022
新品發(fā)布 | Welbuffer生物緩沖液-1分鐘完成試劑配制緩沖溶液是指當(dāng)加入少量強(qiáng)酸、強(qiáng)堿或稍加稀釋時，能保持其pH值基本不變的溶液，它對強(qiáng)酸、強(qiáng)堿或稀釋有一定的抵抗作用。由于緩沖溶液中同時含有較大量的弱酸（抗堿成分）和共軛堿（抗酸成分），它們通過弱酸解離平衡的移動以達(dá)到消耗掉外來的少量強(qiáng)酸、強(qiáng)堿，或?qū)股约酉♂尩淖饔?，使溶液的H+離子或OH-離子濃度沒有明顯的變化，因此具有緩沖作用。用傳統(tǒng)方法配制時需要計算、稱量、混合并使用強(qiáng)酸堿調(diào)節(jié)pH，操作繁瑣費時。月旭科技特推出Welbuffer緩沖速溶顆?；蚱瑒?，能夠解放您的雙手，無需攪拌...

1-12 2022
液相色譜，你問我答（十）“不同色譜柱和不同批次之間的重現(xiàn)性問：我要開始開發(fā)一個新的HPLC方法。驗證之后，該方法將轉(zhuǎn)道QC實驗室并將使用許多年。我擔(dān)心該方法的長期的重復(fù)性，特別是柱子的長期重復(fù)性。怎樣才能確保好的重復(fù)性呢？答：首先，我要表揚(yáng)你在開始做這個方法的時候就能考慮到這個方面。如果可以預(yù)料到該方法將要使用好幾年，在選擇柱子方面就要做些功課。要想使柱子在該方法的可預(yù)見的適用期內(nèi)使用，就要選擇一些大的生產(chǎn)廠家。另外，要選擇一種標(biāo)準(zhǔn)的表面化學(xué)物質(zhì)（比如C18或C8）而不是那些新奇的或很少使用的。下一...

1-11 2022

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