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用好C18液相色譜柱的關(guān)鍵和維護(hù)處理工作

更新時(shí)間:2021-12-20 點(diǎn)擊次數(shù):856
   用好C18液相色譜柱的關(guān)鍵。
 ?、俳?jīng)常沖洗色譜柱。每次使用后,必須用強(qiáng)溶劑沖洗30分鐘左右,或者沖洗床體積(柱體積)的20倍左右。
 
 ?、谧髡咭话闶菍㈤L(zhǎng)期不用的色譜柱浸泡在甲醇中,效果很好。
 
  ③柱頭必須擰緊,不許有任何緩沖液留在色譜柱內(nèi)。
 
 ?、茉诟淖?nèi)軇┑慕M成時(shí),有機(jī)溶劑和水之間的切換應(yīng)該緩慢進(jìn)行,如果快速變換,有可能損壞色譜柱。
 
 ?、輰?duì)于復(fù)雜體系的樣品(如生物樣品、中藥樣品)一定要進(jìn)行預(yù)處理,或者在色譜柱和進(jìn)樣器之間加入保護(hù)柱。
 
  ⑥不能對(duì)一般色譜柱進(jìn)行反沖洗,否則將迅速降低柱效;但是,色譜柱的生產(chǎn)者指明該色譜柱可以反沖洗時(shí)例外。
 
  ⑦不能受到強(qiáng)烈的機(jī)械振動(dòng);不能在壓力和溫度急劇變化的情況下使用,否則色譜柱內(nèi)的填料會(huì)受到影晌。
 
  C18液相色譜柱的維護(hù):
  a.使用預(yù)柱保護(hù)分析柱(硅膠在極性流動(dòng)相/離子性流動(dòng)相中有一定的溶解度)。
 
  b.pH穩(wěn)定范圍是2-7.5,盡量不超過(guò)該色譜柱的pH范圍。
 
  c.避免流動(dòng)相組成及極性的劇烈變化。
 
  d.流動(dòng)相使用前必須經(jīng)脫氣和過(guò)濾處理。
 
  e.如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動(dòng)相,應(yīng)在實(shí)驗(yàn)完畢柱子沖洗干凈,并保存于甲醇或乙腈中。
 
  f.氯化物的溶劑對(duì)其有一定的腐蝕性,故使用時(shí)要注意,柱及連接管內(nèi)不能長(zhǎng)時(shí)間存留此類溶劑,以避免腐蝕。

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